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脫氮硫桿菌特異引物/探針的設(shè)計(jì)和評(píng)價(jià)

論文類(lèi)型 綜述,政策... 發(fā)表日期 2014-10-14
來(lái)源 微生物學(xué)通報(bào)
作者 趙陽(yáng)國(guó),王愛(ài)杰,萬(wàn)春黎,任南琪,白,潔
關(guān)鍵詞 脫氮硫桿菌, 16S rRNA, 引物, FISH, 活性污泥
摘要

自脫氮硫桿菌(Thiobacillus denitrificans)16S rRNA 基因V3 可變區(qū)中發(fā)現(xiàn)一條27 bp 的特異序列, 以該序列為反向引物, 對(duì)高效同步脫硫反硝化系統(tǒng)污泥DNA 進(jìn)行了溫度梯度PCR 擴(kuò)增和基因文庫(kù)構(gòu)建, 結(jié)果證實(shí)了該引物的高度專(zhuān)一性。應(yīng)用該探針在去離子甲酰胺和NaCl 的濃度分別為35%和100 mmol/L, 雜交/洗脫溫度為48°C 條件下對(duì)污泥樣品雜交得到較好的陽(yáng)性結(jié)果, 軟件分析表明脫氮硫桿菌在污泥中約占15%。脫氮硫桿菌專(zhuān)一性引物/探針的提出,

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