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pUCD- recA 重組發(fā)光菌構(gòu)建及對(duì)遺傳毒性污染物響應(yīng)作用

論文類型 技術(shù)與工程 發(fā)表日期 2009-06-01
來源 環(huán)境科 學(xué)
作者 黃新新,,何苗,,,羅虹,,施漢昌,,蔡強(qiáng)
關(guān)鍵詞 重組發(fā)光菌; 遺傳毒性; pUCD- recA 載體; 響應(yīng)效應(yīng)
摘要 基因重組發(fā)光菌在水質(zhì)毒性的評(píng)價(jià)中具有重要的作用, 本研究從分析污染物毒性損傷的機(jī)制出發(fā), 構(gòu)建新型pUCD- recA基因重組發(fā)光菌. 用PCR 法從大腸桿菌W3110 中擴(kuò)增recA 基因, 將其與pGEM-T easy 載體連接后測序. 測序正確的recA 片段及pUCD615 載體均用BamHI 、EcoRI 雙酶切, 連接后電轉(zhuǎn)化導(dǎo)入宿主菌JM109. 挑取克隆, 提取質(zhì)粒用PCR 鑒定, 陽性克隆再進(jìn)行測序. 將構(gòu)建成功的pUCD- recA 載體轉(zhuǎn)化入大腸桿菌RFM443, 加入相應(yīng)的遺傳毒性

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