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免疫磁珠分離與實時定量PCR技術(shù)聯(lián)合檢測水中輪狀病毒的研究

論文類型 基礎(chǔ)研究 發(fā)表日期 2009-05-01
來源 環(huán)境科學(xué)
作者 楊萬,何苗,李丹,施漢昌,劉麗
關(guān)鍵詞 免疫磁珠分離前處理;實時定量PCR;輪狀病毒;環(huán)境水樣
摘要 建立了一種免疫磁珠分離技術(shù)聯(lián)合實時定量PCR 快速定量檢測水中輪狀病毒的方法. 通過制備能夠分離水中輪狀病毒的特異免疫磁珠,優(yōu)化分離條件,建立了免疫磁珠分離前處理方法,并與逆轉(zhuǎn)錄、實時定量PCR 結(jié)合,成功用于水中輪狀病毒的檢測. 研究發(fā)現(xiàn),在1 mL 水樣中加入10μL 輪狀病毒免疫磁珠、0125μL Tween 20、孵育2 h 可達到較好的分離效果;免疫磁珠可用于3 %牛肉浸膏等常用病毒洗脫液中的輪狀病毒的分離,表明該分離技術(shù)能與已有的病毒濃集方法良好地整合. 免疫磁珠分離技術(shù)與實時定量PCR 聯(lián)合

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